新闻动态

HE与mIF配准如何辅助细胞分类复核

作者：

多重免疫荧光（mIF）中标记偏弱或被分到“未分类”的细胞，可以通过对应HE图像补充形态和组织结构线索；HE中外观相似的淋巴细胞，也可以由实测蛋白组合进一步区分。配准建立的是对应查看的基础，不能补回未检测的蛋白信号。

先区分同片与相邻切片的对应尺度

开展分类复核前的对应关系
数据关系 可评估的尺度 需要防止的误读
同一物理切片先mIF后HE 经过质控后可尝试对应同一细胞 局部形变、脱落和分割仍可能导致错配。
相邻切片分别染色 通常先评估组织区域或结构对应 两张切面不保证包含同一批细胞。
只有截图或部分ROI 只能在有共同结构的可用范围内核对 不能把局部可对齐扩大为全片、所有细胞均匹配。

Lin等的2023年Nature Cancer论文采用同一切片的Orion高重荧光与后续HE成像。其同细胞证据来自该实验设计；已有独立HE与mIF图像的项目应先确认切片关系。

文献中的未分类细胞说明了什么

研究第一队列40例结直肠癌样本中，仅靠所用IF panel无法明确归类的细胞比例为6.5%–42%，中位数16%。这是该panel与分割流程下的观察，不是所有mIF实验的固定未分类比例。原文Fig. 3还展示了同片HE如何帮助观察间质、平滑肌及部分弱标记上皮区域。

其中一个样本的锯齿状腺瘤区域PanCK、E-cadherin信号较弱；对应HE提供了组织结构依据。反过来，HE上相似的淋巴细胞则能利用CD3/CD4、CD3/CD8、CD20等实测组合进一步核对。具体身份仍取决于完整panel、信号定位和专业复核。

把“未分类”拆成可检查的原因

分类复核记录模板（教学用途）
发现 对应HE或原图检查 记录与下一步
上皮区域标记偏弱 查看腺体、黏膜及周围组织，核对荧光定位 记录弱信号位置；评估染色和追加marker，保留不确定标签。
长形或密集细胞被错误切开 叠加核/细胞轮廓，核对肌层和间质结构 区分分割问题与表型问题，修正后重算。
淋巴细胞HE形态相近 查看已测T/B细胞组合，而非只凭颜色 记录组合规则、阈值及无法区分的亚型。

此表是复核模板，不含真实患者数据。建议保存细胞或区域ID、原分类、形态依据、蛋白依据、复核结论和剩余疑点，避免只导出一张“修正后”的彩色结果。

从配准到复核的实际顺序

  1. 确认切片关系、尺度和图像方向，选择共同参照。
  2. 检查肿瘤边界、腺体和核密集区等代表位置，标记无法对应或脱落区域。
  3. 将分类标签和分割轮廓回贴到两类原图，按疑点挑选代表区域复核。
  4. 分别记录分割、信号和panel缺失问题；必要时保留未分类，不强行补标签。

软件入口可查看TR-StainSync图像配准与TR-PhenoClass表型分析，具体同细胞可用范围需按图像评估；需要协作可了解图像分析服务。相关延伸包括用HE解释空间模式和将图像指标关联疾病进展。

参考文献与资料

  1. Lin JR, et al. High-plex immunofluorescence imaging and traditional histology of the same tissue section for discovering image-based biomarkers. Nature Cancer. 2023;4:1036–1052. doi:10.1038/s43018-023-00576-1.

内容整理：terrydr｜本文于2026年10月20日更新。文献结果归原研究作者；教学模板、分析建议和软件介绍按文中说明使用。